文献类型： 中文期刊
第一作者： 金李萍
作者： 金李萍;潘晓艺;蔺凌云;姚嘉赟;曹铮;尹文林;赖迎迢;陶家发;刘忆瀚;沈锦玉
作者机构：
关键词： 鲤疱疹病毒Ⅱ型;RNA干扰;ORF57;小干扰RNA;异育银鲫脊髓细胞系;TCID50
期刊名称： 水生生物学报
ISSN： 1000-3207
年卷期： 2022 年 46 卷 004 期
页码： 537-544
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响.首先,以FAM标记的异育银鲫β-actin的siRNA进行CSC细胞转染条件的优化,再将针对CyHV-2 ORF57基因设计的3条siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估siRNA对病毒复制和致细胞病变的影响.转染条件优化结果显示,在siRNA浓度为80 nmol/L,转染液维持24h后更换维持液,β-actin基因表达量最低且观察到的荧光点数量最多.而ORF57-siRNAs干扰结果显示,ORF57-siRNA-2组表现出了较强的抑制效果,在接毒48h时,ORF57-siRNA-2处理组的ORF57基因表达量降到相对于Mock组的33.55%(P<0.01),并且各ORF57-siRNA组都表现出了延缓CyHV-2致细胞病变的时间和强度,抑制时间可达120h.TCID50结果显示,不同组的ORF57-siRNAs均能降低病毒滴度,其中ORF57-siRNA-2将病毒原液TCID50108.487/mL下降至106.776/mL.研究结果表明,干扰ORF57的表达可大大降低CyHV-2的致细胞病变力和复制率,ORF57在CyHV-2复制与致细胞病变中起重要作用.本研究为CyHV-2基于siRNA技术的抗病毒治疗和弱毒株的改造提供了借鉴.
分类号： S943
- 相关文献
[1]病毒编码的转录后沉默抑制蛋白. 成卓敏. 2004
[2]RNA干扰机制研究进展. 成卓敏. 2005
[3]RNA干扰与植物抗病毒. 成卓敏. 2005
[4]RNA干扰及其在口蹄疫病毒防御中的应用. 杨生海,殷宏,刘永生,孙彩琴,陈豪泰,张杰. 2009
[5]RNAi技术及其在作物遗传育种中的应用. 卢东长城,梁荣奇. 2006
[6]RNA干扰在昆虫中的作用机理及应用进展. 施秀珍,吴青君,王少丽,徐宝云,谢文,张友军. 2012
[7]山羊CREM基因siRNA干扰载体的体外构建. 荀文娟,侯冠彧,王定发,周汉林,张春香,任有蛇,岳文斌,施力光. 2014
[8]猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2～4特异siRNA的筛选及其抑制病毒复制效果的研究. 贺云霞,华荣虹,周艳君,安同庆,仇华吉,王云峰,童光志. 2007
[9]RNA干扰的研究进展. 袁克华,冯仁军,程萍,张银东. 2009
[10]羊痘病毒3个结构蛋白的克隆与抗原性分析. 颜新敏,吴国华,李健,朱海霞,朱彩珠,张强. 2010
[11]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析. 周勇,史玉恒,范玉顶,刘文枝,江南,赵建青,许晨,曾令兵. 2018
[12]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析. 周勇,史玉恒,范玉顶,刘文枝,江南,赵建青,许晨,曾令兵. 2018
[13]鲤疱疹病毒Ⅱ型TaqMan real-time PCR检测方法的建立及应用. 周勇,曾令兵,张辉,范玉顶,徐进. 2013
[14]鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备. 彭俊杰,张琪,贾路路,林蠡,袁军法,曾令兵,周勇,刘学芹. 2017
[15]异育银鲫感染鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)后血液生理生化指标变化的研究. 刘文枝,曾令兵,张辉,杨星,徐进,江南,周勇,马杰. 2013
[16]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25B编码蛋白诱饵载体的构建及其互作蛋白的筛选. 聂细荣,薛明洋,林格,李逸群,范玉顶,刘文枝,孟彦,江南,曾令兵,周勇. 2021
[17]鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF4基因的克隆、表达与免疫学检测方法. 周勇,范玉顶,徐进,马杰,江南,刘文枝,曾令兵. 2017
[18]肉食兽类细小病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立与应用. 康洪涛,赵建军,柴秀丽,胡博,张海玲. 2013
[19]核酸杂交技术在禽白血病病毒TCID_(50)测定中的应用. 孟凡峰,范建华,徐步,时建蓬,董宣,崔治中,赵鹏. 2015
[20]BHK-21细胞稳定测定猪乙型脑炎病毒半数细胞感染量效价(TCID_(50))的条件优化及应用. 滕蔓,罗俊,樊剑鸣,邢广旭,赵东. 2010
作者其他论文 更多>>
-
大口黑鲈MsIL-21基因的克隆、表达及其对细菌感染的应答特征
作者：朱雪晴;赵飞;邓玉婷;谭爱萍;赖迎迢;巩华;黄志斌;荆鹏华
关键词：白细胞介素-21 (IL-21);大口黑鲈;维氏气单胞菌;鰤诺卡氏菌;免疫防御
-
维氏气单胞菌CA07株灭活疫苗生产工艺的优化
作者：孙承文;巩华;赖迎迢;江小燕;任燕;陈总会;黄志斌;陶家发
关键词：维氏气单胞菌;灭活疫苗;生产工艺;安全性;免疫原性
-
大口黑鲈白皮病病原菌的分离鉴定及药物敏感性试验
作者：谭爱萍;赵飞;郭忠宝;邓玉婷;张瑞泉;赖迎迢;黄志斌;姜兰
关键词：大口黑鲈;维氏气单胞菌;生长特性;毒力基因;药物敏感性
-
浸泡免疫中的抗原呈递及其佐剂研究进展
作者：巩华;胡军娜;任燕;赖迎迢;黄志斌
关键词：浸泡免疫;抗原呈递;佐剂;鱼用疫苗;黏膜免疫
-
一株湖北源大口黑鲈蛙病毒的分离鉴定
作者：罗晓雯;沈锦玉;阳涛;曾令兵;周勇;范玉顶;刘文枝;李逸群;薛明洋;孟彦;江南
关键词：大口黑鲈;蛙病毒;细胞培养;病毒分离鉴定;
-
一株维氏气单胞菌发酵培养基优化及其制备疫苗免疫效力比较
作者：孙承文;江小燕;赖迎迢;赵长臣;刘春花;任燕;巩华;陈总会;陶家发
关键词：维氏气单胞菌;灭活疫苗;鲫鱼;发酵培养基;响应面分析;免疫效力
-
微型生物养护剂养殖加州鲈对比试验
作者：韦木莲;李湘妮;常藕琴;赖迎迢;余家纯;黄龙;丁成章;蒙烽;吴雅丽
关键词：
