细粒棘球蚴TP_x蛋白的分子特征与反应原性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈英

作者： 陈英;乔军;孟庆玲;刘田莉;钟文强;贡莎莎;王熙凤;黄运福;才学鹏

作者机构：

关键词： 细粒棘球蚴;Eg TPx抗原基因;克隆;表达;反应原性

期刊名称： 贵州农业科学

ISSN： 1001-3601

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 68-73

摘要： 为明确绵羊细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase,TP_x)蛋白的反应原性,并进一步利用Eg TP_x重组蛋白作为Eg感染诊断中的候选标识分子奠定基础,根据GenBank中Eg TP_x基因的cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节为总RNA模板,进行RTPCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,经测序验证后亚克隆至表达载体pET-32a中,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达的重组蛋白进行纯化及反应原性分析。结果表明:Eg TP_x cDNA全长为582个核苷酸,编码193个氨基酸。该多肽含有1个N端糖基化位点,1个N端酰基化位点,5个酪蛋白激酶Ⅱ(CKⅡ)磷酸化位点,4个蛋白激酶C(PKC)磷酸化位点;抗原表位区集中在58~94位和160~188位。重组菌可表达分子量为37ku的重组蛋白,重组蛋白Eg TP_x抗原能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。

分类号： S852.7

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