双价抗虫植物表达载体p3300-bt-pta转化苜蓿的初步研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 熊恒硕

作者： 熊恒硕;康俊梅;杨青川;孙彦;唐克轩

作者机构：

关键词： 双价抗虫;转基因植株;CryIA(a/c)基因;pta基因;紫花苜蓿

期刊名称： 中国草地学报

ISSN： 1673-5021

年卷期： 2008 年 30 卷 01 期

页码： 21-26

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以中苜1号无菌苗子叶为外植体,采用农杆菌介导的叶盘法,将含有CryIA(a)/CryIA(c)基因、半夏凝集素(pta)基因和bar基因的双价抗虫植物表达载体p3300-Bt-pta导入苜蓿子叶中,在含除草剂的筛选培养基中连续筛选,获得抗性转化植株。研究了农杆菌菌液浓度、浸染时间、共培养时间等因素对苜蓿转化效率的影响,结果表明:各因素对苜蓿转化率均有不同程度的影响,当转化的菌液浓度OD600为0.6、浸染时间为10min、共培养时间为3d时转化效率较好。载体的抗性基因为除草剂草丁膦抗性的Bar基因,对子叶外植体的最佳筛选浓度为8mg/L;抑制农杆菌所用Carb的有效工作浓度为400mg/L,以后继代逐次减少用量到100mg/L;按此方法以根癌农杆菌菌株EHA105介导,将双基因Bt和pta导入紫花苜蓿品种"中苜1号",最终获得122棵除草剂草丁膦(ppt)抗性的植株,经过初步的PCR及RT-PCR分子生物学检测,有30棵检测到特异性条带,表明外源基因已成功整合到苜蓿基因组中,并在转录水平得到表达。

分类号： S541.9

  • 相关文献

[1]半胱氨酸蛋白酶基因表达载体的构建及转基因苜蓿的初步研究. 康俊梅,乔建江,王堃,杨青川. 2008

[2]半胱氨酸蛋白酶基因表达载体的构建及转基因苜蓿的初步研究. 康俊梅,乔建江,王垄,杨青川. 2008

[3]新疆大叶紫花苜蓿BADH基因转化体系的研究. 张丽,甘晓燕,石磊,陈虞超,聂峰杰,宋玉霞. 2014

[4]CryIA(a)-pta双价抗虫基因转化粳稻及二化螟抗性评估. 林秀峰,刘志铭,刘德璞,郝文媛,唐克轩,武天龙. 2006

[5]双价抗虫杂交棉苏杂3号杀虫蛋白时空表达规律. 郭三堆. 2006

[6]高品质双价抗虫杂交棉“宁杂602”的品种特性分析. 陈旭升,郭三堆,许乃银,崔洪志,狄佳春,刘剑光,肖松华. 2004

[7]分子检测技术在转基因植物中的研究概况. 朱英,刘永翔,黄永会,刘作易. 2013

[8]利用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因(AlHAK1)棉花植株. 刘灵娣,唐宏亮,董丽君,张书玲,吴立柱,杜环,高佳佳,赵晓雅,刘晗. 2015

[9]基因枪轰击高粱愈伤组织获得转基因植株. 石太渊,杨立国,肖军. 2003

[10]降落PCR法快速检测高羊茅转基因植株. 田路明,黄丛林,张秀海,张潞生,吴忠义. 2006

[11]Bt基因转入烟草叶绿体获得转化植株的研究. 丁玉梅,杨正安,周晓罡,张绍松,孙茂林. 2007

[12]农杆菌介导HaBADH基因转化马铃薯的研究. 张丽,程永芳,巩檑,甘晓燕,聂峰杰. 2016

[13]转基因马铃薯内源农杆菌脱除. 王敬东,石磊,陈晓军,张丽,宋玉霞. 2011

[14]转基因马铃薯内源农杆菌脱除(英文). 王敬东,石磊,陈晓军,张丽,宋玉霞. 2011

[15]转基因玉米植株幼叶DNA快速提取及降落PCR检测研究. 尹祥佳,李永生,王汉宁. 2012

[16]农杆菌介导的菜心遗传转化体系的建立. 张国裕,王岩,程智慧,王晓武. 2006

[17]玉米赖氨酸合成相关基因Mucronate载体的构建及功能验证. 吕庆雪,宋广树,孟令聪,张志军,李春雷,王敏,刘文国. 2015

[18]生长因子FGF10转基因本氏烟草植株的获得及其表达分析. 张雪,王云鹏,乔钰,王萌,郑大浩,邢少辰. 2021

[19]海岛棉DELLA蛋白编码基因GbGAI的克隆与功能初步分析. 曲廷云,王拴锁,彭明,崔百明,郑银英. 2010

[20]花粉介导法获得玉米转基因植物株. 王景雪,孙毅. 2001

作者其他论文 更多>>

微信小程序