稳定表达兔岩藻糖基转移酶RK13细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱杰

作者： 朱杰;缪秋红;郭慧敏;谭永贵;李传峰;孟春春;陈宗艳;刘光清

作者机构：

关键词： 兔岩藻糖基转移酶;RK13细胞;兔病毒性出血症病毒

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2015 年 23 卷 02 期

页码： 1-6

摘要： 为了构建稳定表达兔岩藻糖基转移酶(fucosyltransferase,FUT2)的RK13细胞系,本研究将FUT2基因编码序列插入到慢病毒载体p LOV-GFP-3Flag中,构建了p LOV-3Flag-FUT2重组质粒。将p LOV-3Flag-FUT2与包装质粒ps PAX2和外膜质粒p MD2.G共转染293T细胞,获得重组病毒样颗粒。用含病毒样颗粒的细胞培养上清液感染RK13细胞,并通过嘌呤霉素筛选、纯化,获得稳定表达FUT2的细胞系,命名为RK-FUT2细胞。连续培养10代后,利用PCR、RT-PCR和Western blot方法鉴定,结果表明,RK-FUT2细胞系能够稳定表达兔岩藻糖基转移酶。该细胞系为研究FUT2在兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)感染过程和致病机制中的作用提供了有力工具。

分类号： S852.65

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