猪滋养层细胞囊泡的冷冻保存
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘铁铸
作者: 刘铁铸;小岛敏之;徐晓波;葛云山
作者机构:
关键词: 滋养层细胞囊泡;冷冻保存;猪
期刊名称: 江苏农业学报
ISSN: 10004440
年卷期: 1994 年 02 期
页码:
摘要: 冲洗和轻微抖动子宫角收集猪14日龄的伸展胚胎,剪成0.5mm左右节段,培养2小时,将体外形成的滋养层细胞囊泡(TrophoblasticVesiclesTRV)在含10%甘油(处理1)或10%甘油和0.2M海藻糖(处理2)的Hepes-M199(BSA)冷冻液中平衡并装入0.25ml的塑料细管。处理1和处理2的细管降温至-7℃后植冻并保持10分钟,再以-0.5℃/分钟的速率分别降至-25℃和-36℃后直接浸入液氮保存。细管在室温下解冻,用含0.5M蔗糖的Hepes-M199(BSA)除去抗冻剂,洗涤5次后进行培养。上述不同方法冷冻的猪TRV在解冻后24-48小时以生长囊泡计算成活率,分别为84.8%和79.3%,即可为有关研究提供稳定而可靠的猪TRV来源。该研究还对猪TRV体外培养和冷冻过程中的形态学变化及其分类进行了光镜观察和讨论。
分类号: S828.3
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