异戊烯基腺苷组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 陈以峰
作者: 陈以峰;周燮
作者机构:
关键词: 细胞分裂素,异戊烯基腺苷,酶联免疫吸附测定法
期刊名称: 华北农学报
ISSN: 10007091
年卷期: 1996 年 11 卷 01 期
页码:
收录情况: 北大核心
摘要: 从样品制备,ELISA类型及免疫反应时间三方面着手建立了异戊烯基腺苷(iPA)组细胞分裂素的快速酶联免疫吸附测定法。用NaIO4氧化合成免疫原iPA-N9-BSA(BSA:牛血清白蛋白)。由此获得的免抗血清效价达1:34500。交叉反应试验表明该抗血清只识别iPA组细胞分裂素。因此本研究中采用直接型(即固相抗体型)ELISA,并将最佳免疫反应平衡时间缩短至30min(4℃)。所建立的iPA组ELISA检测极限为4.7fmoliPA/孔,线性检测范围0.01~50pmoliPA/孔,板内、板间的变异系数分别为3.7%和5.3%。样品的稀释曲线与标准曲线平行,回收率为87.1%,表明本研究中采用的80%甲醇提取、Sep-pakC18柱初纯化的快速制样程序适合于该ELISA。对大豆植株不同部位iPAs含量测定结果表明,根瘤与根尖内iPAs含量显著高于幼叶与顶芽内的iPAs含量。
分类号: Q27
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