miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王伟东

作者: 王伟东;滕蔓;郑鹿平;刘金玲;张文凯;李林燕;张志会;樊剑鸣;罗俊

作者机构:

关键词: 马立克病;miR-M11;微小RNA;CRISPR/Cas9;基因编辑;qPCR;复制

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2023 年 001 期

页码: 134-143

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN302为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN302ΔM11(克隆号C58-8-4)。经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析,证实HN302编码的miRM11被精确编辑并从病毒基因组中完全缺失,且未发生回复突变。病毒增殖曲线绘制结果显示,miRM11缺失毒株HN302ΔM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN302(P<0.05)。综上,miR-M11是MDV复制的非必需基因,且其缺失后可增强MDV的体外复制能力。

分类号: S852.65

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