禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 包红梅

作者: 包红梅;王秀荣;刘丽玲;王昱;李一经;陈化兰

作者机构:

关键词: 禽流感病毒;一步法RT-PCR;快速诊断

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2006 年 25 卷 09 期

页码: 701-706

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了能快速准确地对禽流感进行病原学诊断,根据流感病毒的M基因序列,在保守区内用Oligo4.0软件设计了1对引物,建立了一步法RT-PCR诊断方法,其目的片段大小为229 bp。通过对不同稀释倍数的H5亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液进行检测,结果显示,病毒尿囊液的最低检出稀释度为1∶104;阳性棉拭子的最低检出稀释度为1∶23。用病毒分离法和一步法RT-PCR同时检测人工感染鸡不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品,二者符合率为100%,但前者的检测灵敏度比后者高10~100倍。用该方法检测H1~H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原,所有禽流感病毒均有229 bp的目的条带出现,而其他14种禽病病原均无目的条带出现,表明该方法的特异性好。

分类号: S854.43

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