马铃薯32kD抗菌蛋白的cDNA分子克隆研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯洁

作者： 何礼远;袁凤华

作者机构：

关键词： 马铃薯;32KD抗菌蛋白;cDNA克隆

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 1999 年 7 卷 01 期

页码： 37-40

收录情况： CSCD

摘要： 以马铃薯抗青枯病品种为试验材料；采用mRNA微量制备和cDNA快速合成系统，以噬菌体λgtll为载体，构建cDNA表达文库。以32kD抗菌蛋白API抗体为探针，采用免疫杂交技术筛选得到了阳性克隆。采用改进的裂解法纯化重组λgtllDNA，经EcoRⅠ酶切后，直接将目的片断亚克隆到pGEM7Zf（＋）质粒上，经凝胶电泳检测出3个携带有0.5～0．6kbcDNA片断的重组质粒。序列测定后，共获得编码32kD抗菌蛋白靠近基因3’端PolyA尾部的538个核苷酸序列。在国内外首次利用抗体探针获得了植物抗病蛋白编码基因的部分序列，为进一步克隆全长的API蛋白基因奠定了基础。

分类号： Q785

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