新型鸭细小病毒VP3基因克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 经美

作者： 经美;王建昌;崔元;李晓轩;陈萍;王金凤;侯绍华;孙继国;袁万哲

作者机构：

关键词： 鸭细小病毒;VP3;原核表达

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2018 年 06 期

页码： 20-23

收录情况： 北大核心

摘要： 应用PCR方法扩增新型鸭细小病毒(NDPV)VP3基因,将其克隆至原核表达载体pQE1中,获得重组质粒pQE1-VP3。重组质粒pQE1-VP3经优化诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析并利用His标签抗体对表达的蛋白进行Western blot鉴定。结果表明,NDPV VP3蛋白在25℃、IPTG浓度为1.0mmol/L经诱导5h,可获得最大诱导表达量,表达蛋白的分子质量约为60ku,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可获得浓度为5.165 mg/mL及纯度为97%的VP3蛋白。获得的重组菌pQE1-VP3以及高纯度的VP3蛋白,为进一步研究NDPV检测方法和新型疫苗奠定了基础。

分类号： S852.65

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