一种用高拷贝质粒载体制备BAC载体基本功能基因的新方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔红玉

作者： 崔红玉;王亚萍;徐明举;薛永志;石星明;兰德松;王云峰;童光志

作者机构：

关键词： 细菌人工染色体(BAC);高拷贝质粒;BAC载体;单拷贝质粒

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2008 年 36 卷 23 期

页码： 87-89+147

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]简便有效地解决BAC载体序列因单一拷贝数带来的制备以及下游亚克隆操作的困难。[方法]选择适当的单一酶切位点,将单拷贝BAC载体质粒序列全部插入高拷贝质粒pUC119载体的适当位点。[结果]BAC载体基本功能基因序列在新质粒pUC119-BAC中失去了单一拷贝数控制功能,以高拷贝形式进行复制,利用单一酶切,可将BAC载体基本功能基因序列完整切下来,自连后重新恢复严格的单拷贝控制功能。[结论]利用高拷贝pUC119-BAC质粒,实现了BAC载体的基本功能基因序列高拷贝的复制和扩增,可以方便地用于分子克隆化重组病毒转移载体的构建或BAC文库的构建。

分类号： Q782

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[2]黑龙江野鲤细菌人工染色体基因组文库构建. 耿波,关云涛,孙效文. 2009

[3]细菌人工染色体载体的发展和应用. 陈献伟,王会,雷娜,关伟军,马月辉. 2009

[4]基因组文库的构建和池化筛选. 陈献伟,娜日苏,朱超,王会,雷娜,高剑峰,关伟军,马月辉. 2010

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