PCR检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)中假阴性的探讨

文献类型: 中文期刊

第一作者: 闫冬春

作者: 闫冬春;董双林;黄倢

作者机构:

关键词: PCR;假阴性;白斑综合征病毒

期刊名称: 海洋与湖沼

ISSN: 0029-814X

年卷期: 2007 年 38 卷 02 期

页码: 52-56

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用PCR、核酸探针斑点杂交、组织切片等方法研究了PCR检测白斑综合征病毒(WSSV)中的假阴性问题。设计了一对引物用于PCR检测WSSV,PCR扩增的产物长度为235bp,检出极限为0.1pg WSSV DNA。结果表明,PCR检测15例攻毒螯虾鳃样品时出现一例阴性,而经10—106倍稀释后的样品却呈现阳性,推断PCR出现了假阴性。核酸探针斑点杂交及组织切片结果表明注射WSSV的螯虾鳃组织确已被严重感染,进一步证实了PCR假阴性。根据PCR的检出极限及模板稀释梯度,推算出该PCR能成功扩增的引物与模板浓度的比例范围约为2.4×105—2.4×1010。

分类号: S945

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