犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌多重PCR检测方法的建立及初步应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 钱晶
作者: 钱晶;欧阳伟;王晶宇;姚凌云;吴世妍;王晓丽;潘群兴;夏兴霞;诸玉梅;刘军;刘国芳;王永山
作者机构:
关键词: 真菌病;犬小孢子菌;石膏样小孢子菌;须毛癣菌;多重PCR
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2019 年 01 期
页码: 42-48
收录情况: 北大核心
摘要: 宠物浅表皮肤真菌病主要由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌感染引起。本研究根据3种真菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)区域的序列差异设计4条引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,同时对其特异性、灵敏性、重复性进行分析。结果显示,建立的多重PCR方法对犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须毛癣菌基因组DNA均可扩增出特异性预期片段,条带大小分别为286、596、188 bp;最低检测限(灵敏性)分别为12.6、8.8、13.6pg/μL;被检测的6份人工模拟样品扩增结果准确。应用该多重PCR方法检测27份人临床皮屑样品和43份宠物犬、猫毛发样品,结果显示阳性检出率分别为74.07%(20/27)和83.72%(36/43);采用常规真菌分离培养法从阳性样品中获得10株致病性真菌,分离率为17.86%(10/56);两种检测方法的种属鉴定结果表明多重PCR法优于常规方法。本研究建立的多重PCR检测方法简便、特异、灵敏,可同时对宠物浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。
分类号: S852.66
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