利用共转化方法创制携带Pi9抗稻瘟病基因的无选择标记转基因水稻

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘龙玉

作者： 潘龙玉;李军;王歆;刘中来;赵建华;刘雄伦;戴良英;毛雪琴;瞿绍洪

作者机构：

关键词： 水稻(Oryza sativa);共转化;稻瘟病(Magnaporthe oryzae);转基因植物;选择标记

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 433-443

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 水稻稻瘟病是由子囊菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻灾害性病害。培育抗病品种是防治稻瘟病最经济有效的措施之一。水稻Pi9抗稻瘟病基因来源于小粒野生稻并已被克隆和应用于转基因育种。为了提高无选择标记转基因植株的选择效率,将绿色荧光蛋白(GFP)用作可视遗传标记,对双菌株共转化系统进行改良:目的基因载体携带Pi9抗稻瘟病基因;标记基因载体用潮霉素磷酸转移酶(HPT)作为植物转化选择标记,用GFP作为负选择标记,筛除标记基因分离植株。两种载体的农杆菌转化株混合,分别与水稻品种‘浙恢414’、‘浙粳22’、‘浙11B’、‘日本晴’、‘空育131’和‘粤泰B’的愈伤组织共培养,然后从5%～38.3%的起始愈伤组织筛选获得了转化愈伤组织(HPT+GFP+)。对T0植株进行Pi9基因PCR检测,11.8%～77.8%的T0植株为共转化植株(HPT+GFP+Pi9+)。对共转化植株T1代进行绿色荧光检测,筛选阴性植株(GFP-),再通过PCR筛选Pi9+植株。根据13个T1群体的研究结果,61%的共转化植株在T1代分离出无选择标记转基因植株(HPT-GFP-Pi9+)。转Pi9的无选择标记植株和后代株系对水稻稻瘟病呈抗病反应。因此,本研究通过GFP标记提高了双菌株共转化系统的选择效率,转Pi9的无选择标记水稻株系为水稻抗稻瘟病育种提供了有用的遗传资源。

分类号： S435.111.41

  • 相关文献

[1]转基因植物选择标记基因删除技术. 魏毅东,许惠滨,张建福,谢华安. 2010

[2]消除转基因植物中选择标记的研究进展. 董文琦,屈冬玉,王海波. 2004

[3]新型筛选标记磷酸甘露糖异构酶基因在转基因植物中的应用. 郭倩倩,孙熙森,唐益雄,吴燕民. 2011

[4]安全型转基因植物培育技术研究进展. 高翔,别晓敏,佘茂云,叶兴国. 2009

[5]湖北省稻瘟病重发区病菌群体致病性分化的研究. 杨小林,施仕胜,张舒,吕亮,喻大昭. 2016

[6]耐重金属菌株对水稻生长效果研究. 丁自立,吴金平,游艾青,焦春海. 2016

[7]金藻基因工程选择标记的研究. 曹军平,费志清,刘必谦,胡国成,孙宗修. 2001

[8]基因枪法获得无选择标记的1Dx5基因表达的转基因小麦. 王勇,覃建兵,范玲,祝长青. 2013

[9]水稻低直链淀粉含量基因Wx~(mq)的KASP标记开发与利用. 牛付安,周继华,曹黎明,程灿,涂荣剑,胡雪娇,杨佳,孙滨,罗忠永,赵志鹏,王新其,储黄伟. 2019

[10]水稻耐高温TT1基因的功能标记的开发与应用. 胡雪娇,程灿,涂荣剑,周继华,牛付安,杨佳,孙滨,罗忠永,王新其,曹黎明,储黄伟. 2019

[11]硒与氮磷钾肥配施对水稻产量和外观品质及其吸收硒的影响. 龙世方,王孟,吴东梅,刘波,黄芬肖,邢丹英,朱建强,周建利,黄道友. 2019

[12]四引物分子标记鉴定水稻光合效率基因TAC1的不同基因型. 陈国鑫,陈冰,李昊澍,赵坤龙,秦冠男. 2020

[13]干旱条件下外源蔗糖对高表达玉米C4型pepc水稻种子萌发的影响. 张晓敬,李霞,吴博晗,曹悦,王净. 2020

[14]一个水稻白化转绿突变体的遗传及光合生理特性分析. 董华林,武晓智,陈少愚,周鹏,赵锋,费震江. 2014

[15]Cre-LoxP重组系统删除内源性选择标记基因的效能评价. 王志蕊,刘西梅,周荆荣,郑新民,魏庆信,董发明,毕延震. 2014

[16]水稻穗部突变体Cl的形态和定位分析. 郑雷英,朱旭东,钱前,赵忠,张建军,胡筱荷,林鸿宣,罗达. 2003

[17]鄂东南冷浸田不同中稻品种产量及生理研究. 王思潮,曹凑贵,李成芳,汪金平,熊又升. 2014

[18]吡嘧磺隆对水稻苗期生长影响的初步研究. 常向前,张舒. 2013

[19]大肠杆菌甘露糖-6磷-酸异构酶基因(manA/pmi)的克隆及功能鉴定. 杨欣,梁爱华,罗晓丽,吴家和. 2011

[20]水稻基因枪转化过程中选择标记基因的研究. 林鸿生,华志华,卢德赵,高振宇,颜美仙,钱前,黄大年. 2001

作者其他论文 更多>>

微信小程序