利用磁珠构建稻瘟菌cDNA文库

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐锋

作者： 武晓丽;邱德文

作者机构：

关键词： 稻瘟菌;cDNA文库;磁珠

期刊名称： 微生物学报

ISSN：

年卷期： 2008 年 06 期

页码： 806-810

收录情况： CSTPCD

摘要： 本文以稻瘟菌菌丝体为材料提取RNA,【目的】改进张学敏等人的方法,通过磁珠构建稻瘟菌cDNA文库,并用于下一步研究稻瘟菌与水稻之间的互作关系。【方法】通过共价键连接的寡聚oligo(dT)磁珠纯化mRNA,并以磁珠上的oligo(dT)为引物引导第一链cDNA的合成,再利用末端转移酶加尾法合成第二链cDNA。构建过程中避免使用限制酶和连接接头。【结果】用此方法构建的文库容量为8.9×107cfu,滴度为8.9×106cfu/mL,随机挑取的25个克隆插入片断平均大小达到1380bp。【结论】实验结果表明用改进的方法可构建高质量的cDNA文库,并且方便快捷,所用材料少,构建时间短,利于大规模的功...

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