猪源GSDMD蛋白多克隆抗体的制备及初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘佳

作者: 刘佳;宋洁;李帅;王尚辉;李江南;王春凤;翁长江;曾艳

作者机构:

关键词: 猪源GSDMD;多克隆抗体;效价;初步应用

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2024 年 007 期

页码: 968-973

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备猪源GSDMD多克隆抗体,构建了重组表达质粒pET-21a-nGSDMD,成功表达并纯化了重组nGSDMD蛋白。将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备nGSDMD多克隆抗体(pAb),经ELISA检测,抗体效价为1∶64 000。Western-blot和IFA显示该抗体能特异性识别HEK293T细胞中瞬时表达的Flag-GSDMD蛋白和PRRSV感染肺泡巨噬细胞(PAMs)后表达的GSDMD蛋白。该多克隆抗体特异性良好,无交叉反应,能识别检测病毒感染条件下GSDMD切割片段,可用于PRV和PRRSV诱导的细胞焦亡检测。综上,本研究为探究GSDMD蛋白提供了良好的工具,为深入探究GSDMD蛋白的生物学功能奠定了基础。

分类号: S859.797

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