日本沼虾C型凝集素结构域家族3的cDNA克隆、原核表达和定位分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙盛明

作者： 孙盛明;傅洪拓;宣富君;戈贤平;朱健;吴旭干

作者机构：

关键词： 日本沼虾;C型凝集素结构域家族3;嗜水气单胞菌;基因表达

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2019 年 011 期

页码： 2317-2326

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： C型凝集素(C-type lectin)是一类能与糖类结合的非抗体的蛋白质或糖蛋白家族,为了研究C型凝集素基因在日本沼虾组织分布、细胞定位和细菌感染过程中的表达情况,本研究应用cDNA末端快速克隆(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术首次克隆了日本沼虾C型凝集素结构域家族3基因(MnLec3)的全长序列,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析MnLec3基因在不同组织、细菌感染后不同时间的表达水平,Western blot和免疫荧光分别分析蛋白的表达水平和细胞定位.结果显示,MnLec3基因cDNA全长1 357 bp,包括125 bp的5′末端非翻译区(UTR)、1 026 bp的开放阅读框(ORF)和206 bp的3′UTR,其中开放阅读框编码341个氨基酸.氨基酸序列比对显示,日本沼虾MnLec3基因含有保守钙结合点(Met 1-Glu17)和糖识别结构域(CRD).同源性分析结果显示,MnLec3与罗氏沼虾C型凝集素3相似度较高;邻接法(Neighbor-Joining,NJ)进化树分析结果显示,MnLec3与其他甲壳动物C型凝集素聚为一支.通过构建原核表达载体获得体外重组蛋白rMnLec3,并将纯化重组蛋白免疫大鼠获得抗血清,免疫荧光结果显示,绿色荧光信号主要在肝胰腺细胞核中表达.qRT-PCR结果显示,MnLec3在日本沼虾所检测组织中均表达,其中肝胰腺中表达量最高,血细胞次之;与对照组相比,在嗜水气单胞菌刺激12~48 h时MnLec3表达量显著升高,48 h表达量最高,Western blot分析结果显示,MnLec3蛋白表达丰度与基因表达模式基本相似,提示克隆得到的MnLec3参与日本沼虾抵御细菌入侵的免疫过程.

分类号： S917.4

  • 相关文献

[1]日本沼虾两种抗脂多糖因子的特性研究（英文）. 王英慧,修云吉,顾伟,孟庆国,王文. 2017

[2]花生四烯酸对日本沼虾肝胰腺细胞脂质代谢基因表达的影响. 丁志丽,曹访,罗娜,孔有琴,张易祥. 2017

[3]日本沼虾(Macrobrachium nipponense)组蛋白酶B基因克隆及其在组织和卵巢发育过程中的表达. 赵卫红,陈立侨,王资生,张凤英,齐志涛. 2015

[4]两种沼虾溶菌酶基因ORF的克隆和罗氏沼虾溶菌酶基因的组织表达(英文). 高风英,叶星,白俊杰,劳海华,吴锐全. 2005

[5]饲料不同n-3/n-6脂肪酸比值对日本沼虾生长、虾体组分、血清抗氧化及相关基因表达的影响. 蒋振廷,刘波,戈贤平,周群兰,孙存鑫. 2019

[6]日本沼虾几丁质酶1C(MnCht1C)基因的克隆及表达分析. 张文宜,张世勇,陈校辉,乔慧,蒋速飞,熊贻伟,金舒博,龚永生,傅洪拓. 2018

[7]乙醇梭菌蛋白替代鱼粉对日本沼虾生长及代谢的影响. 高国栋,杨昶,Momodou Saidyleigh,刘波,潘良坤,夏冬,孙存鑫,郑肖川,周群兰. 2025

[8]碳酸氢钠对嗜水气单胞菌致病性及其主要毒力相关基因表达的影响. 陈江凤,王广军,郁二蒙. 2017

[9]团头鲂铁蛋白基因的克隆及其在嗜水气单胞菌感染下的表达. 孙盛明,戈贤平,朱健,张成锋,缪凌鸿. 2015

[10]俄罗斯鲟β-防御素基因的克隆及表达分析. 白莉,陈亚东,夏永涛,许式见,胡谋,沙珍霞. 2018

[11]日本沼虾SRAP反应体系正交设计及优化. 姚建华,傅洪拓,龚永生,吴滟,何新龙,李慧萍,乔慧. 2008

[12]长江下游日本沼虾形态特征及主要性状对体重的影响. 刘凯,张敏莹,段金荣,徐东坡,王雯婷,施炜纲. 2011

[13]鱼粉蛋白与发酵酶解豆粕蛋白不同配比对日本沼虾生长及免疫性能的影响. 丁志丽,张易祥,叶金云,周志金,杜震宇. 2015

[14]日本沼虾过氧化物还原酶基因的克隆及其表达分析. 孙盛明,戈贤平,傅洪拓,朱健,张世勇. 2014

[15]饲料糖脂比对日本沼虾生长性能及肝胰腺代谢酶活性、脂肪酸转运和Toll样受体通路相关基因表达的影响. 江婷琪,余王舒,赵小曼,任次成,谢鹏鹏,孔有琴,张易祥,叶金云,丁志丽. 2018

[16]日本沼虾中氨基脲含量检测方法的优化. 宋蓓,程波,宋怿,赵凤娇,王赛赛. 2018

[17]露水草粉碎粒度和添加水平对日本沼虾生长性能、肝胰腺消化酶活性及非特异性免疫指标的影响. 张易祥,丁志丽,吴成龙,明建华,杨霞,邵仙萍,孔有琴,叶金云. 2018

[18]维生素E对日本沼虾生长性能、抗氧化性能及抗氨氮胁迫能力的影响. 孔有琴,丁志丽,张易祥,罗娜,叶金云. 2017

[19]共轭亚油酸对日本沼虾生长、抗氧化及脂质代谢的影响. 丁志丽,孔有琴,张易祥,杜震宇,罗娜,曹访,李景芬,叶金云. 2017

[20]饲料亚麻酸含量对日本沼虾生长、抗氧化能力、非特异性免疫性能及抗氨氮胁迫能力的影响. 罗娜,丁志丽,张易祥,孔有琴,吴成龙,姜志强,叶金云. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序