H7和N9亚型及A型流感病毒多重荧光定量RT-RCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐晓龙

作者： 徐晓龙;包红梅;马勇;施建忠;曾显营;李雁冰;王秀荣;陈化兰

作者机构：

关键词： A型流感病毒;H7N9亚型流感病毒;多重TaqMan荧光定量RT-PCR

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2014 年 36 卷 12 期

页码： 939-942

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为同时检测H7亚型、N9亚型和A型流感病毒,本研究根据流感病毒H7 HA、N9 NA以及M基因序列分别合成3对引物和3种荧光素标记的探针,建立了多重Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,仅H7亚型和N9亚型病毒分别在FAM和JOE通道监测到荧光信号,而所有A型参考流感病毒株均可获得Cy5荧光信号,此外其他相关的禽源病毒检测结果均为阴性。同时,以H7N9亚型病毒RNA为模板建立了标准曲线,检测H7 HA、N9 NA以及M基因的R2值均为0.999,最低检出量均为35.4 EID50/m L。批内和批间试验的变异系数均小于1.48%。利用该方法对1 072份临床样品(咽喉和泄殖腔拭子)检测,H7N9亚型和A型流感病毒分别检出7份和23份。该方法可以有助于H7N9亚型和A型流感病毒的快速检测及鉴定。

分类号： S852.65

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