文献类型： 中文期刊
第一作者： 王 建新
作者： 王 建新;马 润超;周 金柱;卞 贤宇;朱 雪蛟;李 昱辰;张 雪寒;李 彬
作者机构：
关键词： 猪轮状病毒（PoRV）;全基因组测序;遗传进化分析;基因重组
期刊名称：
ISSN： 2095-1191
年卷期： 2025 年 56 卷 3 期
页码： 932-943
摘要： 目的分离鉴定G1P［7］型猪轮状病毒（PoRV）并进行全基因组分析，为仔猪腹泻病防控及疫苗研发提供理论依据。方法腹泻仔猪粪便样本由南京农业大学动物医学院提供，对样本进行猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）及PoRV PCR检测。向PCR检测结果为阳性的样本上清液中加入胰蛋白酶，随后接种到MA104细胞进行病毒分离和纯化。通过PCR检测、电镜观察、间接免疫荧光检测和RAN-PAGE检测鉴定毒株。通过绘制病毒增殖曲线和检测病毒对MA104、Vero、IPEC-J2、HT-29、HRT-18和Caco-2细胞的易感性探究毒株生物学特性。利用生物信息学软件分析分离毒株的11个基因与国内外各基因型轮状病毒的同源性并构建病毒全基因组系统发育树。结果粪便样本PCR检测结果显示，粪便样本中仅PoRV呈阳性。成功分离出1株PoRV，将该毒株命名为JSNJ2023，病毒在MA104细胞上能稳定增殖和传代，经3次克隆，筛选出适合的克隆株，在第3次克隆中，选择病毒滴度最高的克隆株进行扩大培养，最终成功获得高滴度的单克隆毒株。病毒颗粒呈明显的球形结构，具有清晰的双层衣壳特征，直径约70 nm。间接免疫荧光检测结果显示，JSNJ2023毒株能感染MA104细胞。RNA-PAGE检测结果显示，JSNJ2023毒株具有A群轮状病毒特征性的11条电泳图谱，排列方式为4∶2∶3∶2。病毒增殖曲线显示，接种病毒18 h后JSNJ2023毒株在MA104细胞中的病毒滴度达峰值，随着感染时间的延长，病毒滴度逐渐降低。JSNJ2023毒株对细胞的易感性依次为MA104、IPEC-J2、HRT-18、HT-29、Caco2和Vero细胞。基因同源性分析与系统发育树构建结果显示，JSNJ2023毒株属于猪A群G1P［7］型轮状病毒，其基因型为G1-P［7］-I5。结论成功分离获得PoRV JSNJ2023毒株，其属于A群G1P［7］型轮状病毒，基因型为G1-P［7］-I5。JSNJ2023毒株与人、猪及牛轮状病毒存在高度同源性，其进化过程中可能受到人轮状病毒、PoRV与牛轮状病毒的影响，发生了基因重组或交换，形成了独特的基因型（R1-C1-M1-A8-N1-T7-E1-H1）。
分类号：
- 相关文献
[1]多重基因重组型HH9N2亚型AIV福建分离株全基因组的分子特征. 陈翠腾,万春和,傅光华,陈珍,朱春华,黄瑜. 2018
[2]牛病毒性腹泻病毒LN-1株的分离鉴定及基因组序列分析. 刘可欣,王超,张傲,刘佳利,谭斌,张淑琴. 2023
[3]猪流行性腹泻病毒CH/SCJY/2022株的分离鉴定及遗传进化分析. 吴学婧,于吉锋,肖璐,毛从剑,叶勇刚,曾凯,潘梦,谢晶,曹冶,李兴玉,林毅,叶健强,张先惠,魏勇,青易,康润敏. 2024
[4]一株BVDV-2型的分离鉴定及遗传进化分析. 刘佳莹,孙超,陈天祥,尹鑫,孙东波. 2025
[5]柞蚕强伐势杂交种-抗大*(8821·8822). 王德生. 2008
[6]超级稻新品种辽星1号. 王德生. 2009
[7]"三高"大豆良种辽豆11号. 王德生. 2012
[8]基因重组构建甘蔗糖蜜酒精高产酿酒酵母菌株. 陈东,陆琦,陈小玲,芦志龙. 2017
[9]Genome shuffling研究进展及其在微生物育种中的应用. 张红岩,王青艳,黄日波. 2009
[10]培迪广亲和基因重组效应的研究. 罗孝和,邱趾忠. 1990
[11]农用抗生素产生菌菌种选育的研究进展. 唐伟,孙军德,张翠霞. 2004
[12]猪IFNα基因在毕赤酵母中的高效分泌表达. 黄海,谢蓓,于瑞嵩,刘惠莉,张德福,曹祥荣,李震. 2005
[13]中国1995～2004年鸡传染性支气管炎病毒地方分离株膜蛋白基因的遗传变异分析. 聂磊,张庆霞,韩宗玺,邵昱昊,荣骏弓,刘胜旺,孔宪刚. 2007
[14]利用RecTE基因重组体系构建hrpS基因缺失型冠菌素工程菌株. 何彦,姜峰,王春英,于春欣,谭伟明,李召虎,张杰,段留生. 2020
[15]禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展. 邓小芸,祁小乐,高玉龙,高宏雷,秦立廷,王永强,王笑梅. 2010
[16]大麦黄矮病毒GPV与GAV株系间异源装配现象的初步研究. 王锡锋,周广和. 2005
[17]山东及周边部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异与遗传演化分析. 胡栋,徐煜琳,朱迎春,赵情,王亭亭,庞恒,李传刚,于江,常维山,吴家强,彭军. 2019
[18]1株基因重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的新型变异和遗传进化分析. 胡栋,朱迎春,赵情,庞恒,李传刚,王亭亭,常维山,彭军,吴家强. 2021
[19]传染性法氏囊病病毒的自然重组. 祁小乐,高立,王笑梅. 2016
[20]乳酸菌基因组研究应用进展. 马长路,逄晓阳,张书文,刘鹭,芦晶,吕加平. 2016
