马γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 白宇

作者: 白宇;童铁钢;张维军;徐树兰;王群;刘光亮;吴东来

作者机构:

关键词: 马γ-干扰素;夹心ELISA

期刊名称: 细胞与分子免疫学杂志

ISSN: 1007-8738

年卷期: 2008 年 05 期

页码: 464-466

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的:建立检测马γ-干扰素的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法。方法:将识别不同表位的抗马γ-干扰素的2株单克隆抗体(mAb,A5和SB10)纯化后,利用生物素标记试剂盒对其中1株纯化的mAb(SB10)进行标记,通过对重组马IFN-γ进行ELISA检测来建立马γ-干扰素双抗体夹心ELISA。结果:经过方阵滴定实验确定捕获抗体的最佳浓度为1mg/L,检测抗体的工作效价为1∶1000。利用建立的方法对不同稀释度的重组马γ-干扰素和丝裂原刺激的马外周血单核细胞培养上清进行检测。结论:此方法检测敏感度达到1μg/L,特异性良好,为马的细胞免疫学研究提供了方法,并为建立马γ-干扰素ELISPOT检测方法奠定了基础。

分类号: S854.4

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