中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的表达和活性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 马冬梅

作者: 马冬梅;白俊杰;简清;劳海华;叶星;罗建仁

作者机构:

关键词: 中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂;毕赤酵母;基因表达;蛋白酶抑制活性

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2003 年 19 卷 05 期

页码: 88-92

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂 (Cystatin)的功能并探索其在水产加工和病害防治中的应用潜力 ,将PCR改造后的编码成熟肽中华鲟 (Acipensersinensis)cystatin基因亚克隆到毕赤酵母整合型表达载体pPICZαA ,氯化锂法转化毕赤酵母菌株GS115 ,构建表达cystatin的酵母基因工程菌。经甲醇诱导、SDS PAGE检测培养基上清液 ,表明中华鲟cystatin在毕赤酵母中实现了高效表达 ,重组cystatin表达量约为 2 15mg·L- 1 。纯化后重组蛋白纯度达94 .2 %。生物活性检测结果表明 ,1μg重组中华鲟cystatin约能抑制 15 μg木瓜蛋白酶的水解活性

分类号: Q55

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