口腔癌细胞Cal27外泌体对人正常牙龈成纤维细胞的生物学作用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 贾美娥
作者: 贾美娥;李志勇;徐凯;王怡衡;于菲;何祥一
作者机构:
关键词: 口腔癌;外泌体;细胞增殖;细胞迁移;成纤维细胞
期刊名称: 华西口腔医学杂志
ISSN: 1000-1182
年卷期: 2021 年 03 期
页码: 313-319
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的通过将Cal27外泌体(Cal27-exo)与正常人牙龈成纤维细胞(NHGFs)共培养,测定共培养后NHGFs+Cal27-exo的增殖迁移能力及相关蛋白表达情况,探讨Cal27-exo对NHGFs的活化及生物学行为的影响。方法采用超速离心法提取Cal27-exo,并用蛋白免疫印迹(Western blot)、透射电子显微镜以及粒径分析对外泌体进行鉴定。将Cal27-exo与NHGFs共培养,检测NHGFs对Cal27-exo的摄取情况,用划痕实验和CCK8检测NHGFs+Cal27-exo的迁移和增殖能力,用实时荧光定量聚合酶链反应检测NHGFs活化相关蛋白金属基质蛋白酶9 (MMP-9)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)和转化生长因子β(TGF-β)的mRNA表达。结果超速离心法提取的Cal27-exo中Alix和CD63表达阳性;透射电子显微镜示Cal27-exo呈类圆形双层膜性囊泡;粒径检测示Cal27-exo直径为30~150 nm。共培养后Cal27-exo进入NHGFs内,划痕实验结果示NHGFs+Cal27-exo的迁移能力强于NHGFs,CCK8结果示NHGFs+Cal27-exo的增殖活力强于NHGFs。实时荧光定量聚合酶链反应结果显示,与NHGFs相比,NHGFs+Cal27-exo的MMP-9表达上调,TGF-β、αSMA mRNA表达下调(P<0.05)。结论 NHGFs+Cal27-exo的增殖活性和迁移能力明显增强,相关蛋白的mRNA水平改变。Cal27-exo能活化NHGFs,对肿瘤的侵袭转移有潜在意义。
分类号: R739.8
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