转座子Tn5096对刺孢吸水链霉菌北京变种RF220转座的诱变

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张应禄

作者： 张应禄;朱昌雄;白兰芳;王以光

作者机构：

关键词： 限制修饰系统;吸水链霉菌;转座子

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 1005-7021

年卷期： 1999 年 06 期

页码： 510-514

收录情况： 北大核心

摘要： 用大肠杆菌／ 链霉菌穿梭质粒ｐＣＺＡ１６８（ ｂｌａ，ｔｓｒ，Ｔｎ５０９６ ，ＣｏｌＥＩｒｅｐ ，Ｓｔｒｅｐ ｒｅｐｔｓ） 多次转化农抗１２０ 产生菌刺孢吸水链霉菌北京变种（ Ｓ．Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｐｉｎｏｃｕｓ ｖａｒ． ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ）ＲＦ２２０ 的原生质体，均未得到转化子。来自吸水链霉菌应城变种（ Ｓ．Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ ｖａｒ．）１０ － ２２ 突变株的链霉菌质粒ｐＩＪ７０２（ｔｓｒ ｍｅｌ＋ ） 可以转化ＲＦ２２０ ，但转化频率只有数十个转化子／μｇＤＮＡ。用来自ＲＦ２２０ 本身的ｐＩＪ７０２ 对消除ｐＩＪ７０２ 后的ＲＦ２２０ 的原生质体进行了再转化，转化率没有明显的提高。用氨苄青霉素和甘氨酸协同处理ＲＦ２２０ 的菌丝体，并经－ ７０ ℃冷冻原生质体再转化，得到了４ 个ｐＣＺＡ１６８ 的转化子。质粒提取、酶切、抗性测定表明：４ 个转化子中ｐＣＺＡ１６８ 中大肠杆菌ＤＮＡ 部分均被切除，成为大小约５０ ～６０ｋｂ的小质粒，命名为ｐ ＷＺＨ１０２（ｔｓｒ，Ｔｎ５０９６ ，ｓｔｒｅｐ ｒｅｐｔｓ） 。用ｐ ＷＺＨ１０２ 上的转座子Ｔｎ５０９６ 对ＲＦ２２０ 进行转座实验，在

分类号： Q933

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