鸡源九次跨膜蛋白TM9SF2基因克隆及其蛋白特征分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张敏霞

作者： 张敏霞;池周颖;瞿孝云;刘杨;曾庆航;李昌;廖明

作者机构：

关键词： chTM9SF2;克隆;序列分析;表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2023 年 43 卷 011 期

页码： 2298-2307

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鸡九次跨膜超家族成员2(chicken transmembrane 9 superfamily 2,chTM9SF2)预测序列设计引物,以原代鸡胚成纤维细胞CEF、鸡成纤维细胞系DF1和鸡肝癌细胞LMH的cDNA为模板,采用PCR方法扩增chTM9SF2编码序列,并利用MEGA 7.0、Clustal W、SWISS-MODEL等生物信息学工具对鸡、鸭、人、鼠等不同物种来源的九次跨膜超家族成员2(transmembrane 9 superfamily 2,TM9SF2)进行遗传进化、同源性、结构域及结构模拟等分析;进而通过构建真核表达质粒,利用Western blot、激光共聚焦显微镜探究chTM9SF2的表达和亚细胞定位.结果显示,分别在3类细胞中均可成功获得编码序列一致的chTM9SF2基因,与禽类的同源性最高,且高度保守;该基因能够在DF-1细胞中表达,且主要定位于晚期内体或溶酶体膜.结果表明,成功扩增获得chTM9SF2基因,并在DF-1细胞成功表达,分析其定位于晚期内体或溶酶体膜,为进一步研究chTM9SF2的生理功能及在病原感染中的作用奠定了基础.

分类号： S852.2

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