猪肺炎支原体脂蛋白LppB的克隆表达及其编码氨基酸的生物学分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘威

作者： 刘威;袁芳艳;周丹娜;刘泽文;杨克礼;段正赢;郭锐;蔡行;刘保亮;吴修竹;肖少波;田永祥

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;脂蛋白;密码子改造;二级结构

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 2275-2280

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在获得猪肺炎支原体脂蛋白LppB的表达产物,分析其编码氨基酸的生物学特性,为进一步研究脂蛋白LppB的功能奠定基础。试验构建重组表达质粒pET30a-LppB,通过快速定点突变试剂盒将LppB基因中1 068,1 353,1 578nt处的A突变为G,使改造后的LppB基因能在大肠杆菌系统中正确表达,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行蛋白纯化。SDS-PAGE分析结果显示,IPTG诱导表达后获得一条特异性蛋白条带,相对分子质量约为70 000,与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白主要以可溶的形式表达于上清中;Western blot鉴定结果表明纯化的蛋白能与抗6×His标签的单抗发生特异性反应。采用DNAStar Protean模块对脂蛋白LppB进行了二级结构、蛋白质骨架柔性区域、抗原指数的预测,并确定了B细胞抗原优势表位的可能分布。

分类号： S852.62

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