鸽β-防御素5基因克隆及其抗菌活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 辛胜男

作者： 辛胜男;张可心;张名岳;韩宗玺;邵昱昊;刘晓丽;刘胜旺;马得莹

作者机构：

关键词： 鸽β-防御素5;重组蛋白;抗菌活性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2012 年 28 卷 11 期

页码： 1294-1305

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从鸽的骨髓和肝组织中扩增到2个禽β-防御素(AvBD)基因,在大肠杆菌中高效表达,检测其重组蛋白的抗菌活性。应用RT-PCR方法从鸽的骨髓和肝脏组织中扩增AvBD5基因,根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-5的氨基酸序列构建系统进化树,将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对该重组蛋白进行纯化,测定体外抗菌活性与理化特性。测序得到这2个基因的cDNA大小均为201 bp,编码66个氨基酸残基,内含6个位置保守的半胱氨酸残基。经遗传进化分析发现,该基因推导的两组氨基酸序列与鸭AvBD5的同源性最高,分别为87.9%和78.8%,这两组氨基酸序列的同源性为83.3%。因此,将其分别命名为鸽AvBD5α(骨髓)和鸽AvBD5β(肝脏)。进一步将这两个基因分别亚克隆到大肠杆菌pGEX-6p-1载体中进行原核表达。两个重组融合蛋白经纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响,及其融合蛋白的溶血活性。结果表明,重组鸽AvBD 5α、AvBD 5β融合蛋白的分子量约为32 kDa。具有明显的抗菌活性,对12种细菌均有不同程度的抑制作用,高盐浓度对其抗菌活性显著影响。此外,这两个重组蛋白对红细胞无显著溶血活性。

分类号： S836

  • 相关文献

[1]鸽β-防御素1基因的克隆及其生物学作用鉴定. 李妍妍,徐杨,张婷婷,徐倩倩,韩宗玺,刘胜旺,马得莹. 2014

[2]鸭β-防御素2基因的克隆、表达和表达产物的生物学特性分析. 王瑞琴,廖文艳,马得莹,韩宗玺,刘胜旺. 2009

[3]鸭β-防御素5基因的分离、鉴定及其生物学作用. 张可心,蔺利娟,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2011

[4]重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析. 马得莹,徐杨,李妍妍,徐倩倩,张婷婷,韩宗玺,刘胜旺. 2014

[5]鹌鹑β- 防御素10基因的克隆与表达及其体内分布的检测. 蔺利娟,王瑞琴,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,程宝晶,孙黎,李子瑞,马得莹. 2011

[6]鸭β-防御素9基因的克隆、组织分布及其原核表达. 廖文艳,马得莹,刘胜旺,韩宗玺. 2009

[7]鹌鹑β-防御素10基因的克隆与表达及其体内分布的检测. 蔺利娟,王瑞琴,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,程宝晶,孙黎,李子瑞,马得莹. 2011

[8]鸭β-防御素4cDNA的克隆、表达及其抑菌活性的初步分析. 蔺利娟,韩宗玺,邵昱昊,张可心,刘胜旺,李子瑞,马得莹. 2011

[9]重组鸡β-防御素2蛋白的表达与生物学活性鉴定. 马得莹,张婷婷,徐杨,高梦莹,王秋玲,徐倩倩,韩宗玺,刘胜旺. 2015

[10]鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究. 王瑞琴,蔺丽娟,周财源,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2010

[11]TLR-4介导的鹅β-防御素1抗肠炎沙门菌感染的信号传导机制初探. 张名岳,张可心,辛胜男,韩宗玺,邵昱昊,刘晓丽,刘胜旺,马得莹. 2012

[12]鹌鹑β-防御素10基因的克隆及其生物学作用的初步研究. 蔺丽娟,王瑞琴,周财源,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2010

[13]鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析. 周财源,蔺利娟,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2011

[14]一个新的禽β-防御素;鹅β-防御素5基因克隆与生物学特性的初步分析. 周财源,蔺丽娟,韩宗玺,邵昱昊,刘胜旺,马得莹. 2010

[15]鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究. 廖文艳,马得莹,王瑞琴,韩宗玺,邵昙昊,李慧昕,刘胜旺. 2009

[16]猪圆环病毒2型抗体检测间接ELISA方法的建立. 丛丽媛,蒋智勇,张春红,陈德坤,宋长绪. 2008

[17]小麦胚乳14-3-3基因的克隆及其重组蛋白的原核表达. 戴双,李豪圣,程敦公,刘爱峰,曹新有,刘建军,宋健民. 2012

[18]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011

[19]亲和标签在重组蛋白表达与纯化中的应用. 陈爱春,彭伟,汪生鹏. 2012

[20]泰勒焦虫重组蛋白TaSP-Tams1-SPAG1间接ELISA检测方法的建立. 魏玉荣,易忠,马文戈,郭会玲,向银珍,米晓云,陈智,魏婕,苗书魁,吴国梁,祁巧芬,埃尼瓦尔·太外库力,黄炯. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序