日本血吸虫PDIA3的原核表达和多抗血清制备

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘群

作者: 刘群;段明明;苑纯秀;李丹丹;葛程;马丽贞;冯新港

作者机构:

关键词: 日本血吸虫;SjPDIA3;原核表达;多克隆抗体

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2015 年 01 期

页码: 33-38

摘要: 为获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)PDIA3(Sj PDIA3)重组蛋白,并制备多克隆抗体血清,本研究以日本血吸虫c DNA文库为模版,利用PCR技术扩增得到PDIA3 ORF全长,并克隆到p ET28a(+)载体中,将得到的重组质粒p ET28aSj PDIA3转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后His-Ni柱亲和层析纯化得到Sj PDIA3重组蛋白,利用重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,Western blot分析重组蛋白的免疫原性。扩增得到长为1482 bp日本血吸虫PDIA3的ORF序列,该序列编码493个氨基酸,含两个硫氧还原蛋白结构域和一段信号肽,无扩膜结构。在原核表达系统中表达得到大小为55 k Da的Sj PDIA3重组蛋白,分析显示其具有良好的抗原性。

分类号: S852.735

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