多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张爱芹

作者： 张爱芹;郭东春;刘家森;原冬伟;姜骞;林欢;崔玉东;曲连东

作者机构：

关键词： 多杀性巴氏杆菌;purF基因;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2013 年 34 卷 01 期

页码： 10-14

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51-17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,构建重组表达质粒pHT-PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1∶128 000,Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。

分类号： S852.612

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