猪细小病毒AV30 VP2基因在昆虫细胞中表达及其免疫原性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李茜

作者： 李茜;代军飞;丁耀忠;ASHENAFI Kiros Wubshe;李国秀;马炳;张杰

作者机构：

关键词： 猪细小病毒;VP2基因;昆虫杆状系统;VLP;免疫原性

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 007 期

页码： 852-860

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究选用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统构建含有猪细小病毒AV30未优化、优化后衣壳蛋白VP2基因的重组杆状病毒,感染sf9、HF细胞表达VP2蛋白.首先,扩增PPV AV30得到VP2基因,测序后由公司根据昆虫细胞嗜性进行基因优化.同时构建并收获未优化、优化重组杆状病毒r BacVP2.其感染HF细胞后,进行Western-blot及IFA实验分析表明,未优化、优化VP2蛋白在昆虫细胞中正确表达,分子质量约为64 ku,并具有良好的反应原性.电镜观察,未优化、优化VP2蛋白均自我组装成VLP,与PPV AV30病毒粒子大小形状相似.最后,用VP2-VLP免疫BALB/c小鼠,能刺激小鼠产生抗PPV的特异性抗体.免疫后的小鼠脾脏淋巴细胞在PPV AV30病毒的刺激后,出现显著的增殖情况,同时产生了Th1和Th2型相关细胞因子.本研究成功构建了VP2-VLP,并在小鼠实验中显示了良好的免疫效果,为以VP2为表位载体的嵌合型病毒样颗粒疫苗进一步研制奠定了基础.

分类号： S852.651

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