H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及在E.coli中的表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘威龙

作者: 刘威龙;焦培荣;刘畅;阿合买提·买买提;陈化兰

作者机构:

关键词: H5N1禽流感病毒;NS1蛋白;克隆;原核表达;纯化

期刊名称: 新疆农业大学学报

ISSN: 1007-8614

年卷期: 2007 年 30 卷 03 期

页码: 69-72

摘要: 选择一株H5N1亚型高致病性禽流感病毒株A/Goose/Guangdong/1/96(简写为GD/1/96),根据测得的NS基因序列,设计一对特异性引物NS1U/NS1L,RT-PCR方法扩增该毒株的NS1基因。将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体PET-32a(+),并进一步酶切分析和序列测定,鉴定出NS1基因的阳性重组子。阳性质粒转化E.coliBL 21(DE3)感受态细胞,在IPTG诱导下,经SDS-PAGE和Western-blotting分析鉴定,成功的在细菌包涵体中表达出45 kD的NS1融合蛋白。重组蛋白经Ni-NTA His.Bind Resins纯化。

分类号: S852.65

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