小尾寒羊CIB1基因全长cDNA克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 于艳

作者： 于艳;王楚端;李宏滨;魏彩虹;孙丹;陆建;刘开东;吕雁飞;杜立新

作者机构：

关键词： 小尾寒羊;CIB1;克隆;原核表达

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2009 年 40 卷 12 期

页码： 1712-1717

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在克隆小尾寒羊钙粘和蛋白1(Calcium and integrin binding protein 1,CIB1)基因cDNA全长,并在原核载体中表达。参照已发表的CIB1基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物,采用RT-PCR法,从小尾寒羊睾丸组织中扩增获得CIB1基因全长cDNA。将其克隆到pMD19-T载体,并进行测序分析。将该基因编码区重组于融合表达质粒pET32a中,构建了重组原核表达载体(pET32a-CIB1)。将其转化到BL21(DE3)pLysS宿主菌中,用IPTG进行诱导表达。结果表明,克隆的CIB1基因cDNA与GenBank上登录的牛、猪、猕猴、人、小鼠、大鼠、黑猩猩等动物该基因序列的同源性达90%以上,编码氨基酸的同源性在93%以上,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为576 bp。实现了高效特异性融合表达,表达产物的分子质量约为38 ku。本研究结果为进一步研究CIB1蛋白功能打下良好的基础。

分类号： S826`Q78

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