非洲猪瘟病毒P30-54融合蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及反应原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李杰

作者： 李杰;张星星;郭晶;张国武;王晓婷;李妍;才学鹏;孟庆玲;乔军

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;P30-54融合蛋白;杆状病毒表达系统;反应原性

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2019 年 3 期

页码： 684-688,699

摘要： [目的]非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种严重危害猪养殖业的急性烈性传染病.[方法]为了制备特异性强、敏感性高的ASFV血清学诊断用抗原,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了ASFV P30-54融合蛋白基因.将P30-54融合蛋白基因克隆入杆状病毒转座载体质粒pFastBac1中,构建重组质粒pFastBac-P30-54;将重组质粒转化DH10 Bac感受态细菌进行重组,经抗性与蓝白斑筛选得到杆状病毒重组质粒Bacmid-P30-54;将reBacmid-P30-54转染sf9细胞,获得重组杆状病毒reAcMNPV-P30-54.将获得的reAcMNPV-P30-54接种sf9细胞,待细胞出现CPE时收集细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)和SDS-PAGE进行分析重组蛋白的表达情况;通过Western blot检测重组蛋白的反应原性.[结果]在重组杆状病毒中成功表达P30-54蛋白,该重组蛋白可与ASFV多克隆抗体发生免疫学反应.[结论]证实该重组蛋白具有良好的反应原性.

分类号： S852.651

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