猪PBD1成熟肽基因在干酪乳酸杆菌中的表达及其抑菌活性的检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨兴武

作者： 杨兴武;郭奎;韩昊莹;赵宇;郑慧华;杨明凡;陈红英

作者机构：

关键词： 猪β防御素1;成熟肽基因;干酪乳酸杆菌;表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 2 期

页码： 179-183

摘要： 为获得一株能够稳定表达猪β防御素-1 (PBD1)成熟肽蛋白的重组干酪乳酸杆菌,本研究将PBD1成熟肽基因克隆至含有短小干酪乳酸杆菌信号肽的pUCK-SP载体中,再将SP-PBD1亚克隆到干酪乳酸杆菌整合性表达质粒pMJ67的Lac启动子下游,获得重组质粒pMJ67-SP-PBD1,电转化入干酪乳酸杆菌,经红霉素抗性筛选和基因组DNA PCR测序鉴定,证实猪PBD1基因整合到了干酪乳酸杆菌中.采用半定量RT-PCR分析显示,经2%乳糖诱导18 h后的重组菌中猪PBD1 mRNA含量最高.Western blot检测显示,经乳糖诱导的重组菌表达了约5.8 ku的目的蛋白,与PBD1成熟蛋白理论分子量相符.抑菌试验结果显示重组PBD1对葡萄球菌具有明显抑制作用.表明猪PBD1基因在重组干酪乳酸杆菌中获得了表达,且具有抑菌活性.本研究为进一步研发具有广谱抗菌作用的微生态制剂奠定了基础.

分类号： Q78

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