生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯二凯

作者： 冯二凯;程悦宁;罗国良;易立;王振军;郭利;陈立志;程世鹏

作者机构： 中国农业科学院特产研究所;吉林特研生物技术有限责任公司

关键词： Vero细胞;大规模培养;微载体;悬浮培养;生物反应器

期刊名称： 中国兽药杂志

ISSN： 1002-1280

年卷期： 2019 年 6 期

页码： 41-47

摘要： 为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响.结果显示,在含有5 g/L微载体的DMEM培养基中接种Vero细胞(30~40 cells/球),设定p H、温度、溶氧值和转速分别为7.2、37℃、50%和55 r/min,培养方式为批次培养(0~48 h)+灌流培养(48~96 h)组合方式,培养Vero细胞3~4 d或细胞密度达到200 cells/球以上时,按照MOI=0.0001~0.001吸附接毒,调低温度(33℃)继续培养100~120 h,即可获得高滴度病毒液(106.5~107.2TCID50/0.1 m L),经无菌检验合格后,配制水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养),疫苗符合《中国兽药典》三部(2015版)的规定.试验建立了7 L生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗的新工艺,为进一步规模化生产奠定了基础.

分类号： S859.53

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