应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B

文献类型： 中文期刊

第一作者： 任芳

作者： 任芳;张尊平;范旭东;胡国君;张梦妍;董雅凤

作者机构：

关键词： 葡萄;葡萄病毒B;实时荧光定量RT-PCR;常规RT-PCR

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2019 年 4 期

页码： 569-576

摘要： 本研究建立了葡萄病毒B的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测技术.该技术标准曲线扩增效率102.4%,相关系数0.999,最低检测限达10-4倍稀释cDNA,灵敏度为常规RT-PCR的100倍.重复性试验组内和组间变异系数分别为0.00%~0.65%和0.02%~2.00%,表明检测稳定性好.该技术对田间葡萄样品检测适用范围广,对枝条和老叶柄检测效果最好,冬季枝条和春夏秋季所有老叶柄样品检出率均为100%,与常规RT-PCR检测结果一致.对于其他季节或部位样品,RT-qPCR检出率(43%~74%)则普遍高于常规RT-PCR(5%~71%),特别是春季样品和春夏秋季所有嫩叶样品,检出率比常规RT-PCR分别高31%和38%.对来自我国13个省21个品种的52份田间葡萄样品检测结果表明,RT-qPCR共检测到6个样品为阳性,检出率11.5%,为常规RT-PCR(检出率5.8%)的2倍.

分类号： S436.631.1

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