具有中和活性的鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王怡平

作者： 王怡平;张忠伟;蒲路莎;赵丽丽;陈洪岩

作者机构：

关键词： 鸭肠炎病毒;单克隆抗体;中和活性

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2019 年 8 期

页码： 977-982

摘要： 为制备抗鸭肠炎病毒(DEV)的单克隆抗体(MAb)并对其生物学活性进行鉴定,本研究采用蔗糖密度梯度离心法提纯DEV鸭胚成纤维细胞适应毒,以此作为抗原免疫BALB/c小鼠,随后取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,有限稀释法克隆杂交瘤细胞株,经间接ELISA筛选,获得了1株稳定分泌抗DEV MAb的杂交瘤细胞株2E3.鉴定结果显示,该MAb为Ig M亚类,ELISA效价可达到1∶10~5以上;间接免疫荧光试验(IFA)中MAb可与细胞中增殖的DEV结合,Western-blot试验中MAb不与变性病毒蛋白作用,表明该MAb可能是构象表位的单抗;病毒中和试验表明,该MAb具有较强的病毒中和活性.上述结果表明,本试验获得的一株具有DEV中和活性的MAb杂交瘤细胞株为建立DEV的检测方法和DEV的相关研究提供了材料支持.

分类号： S852.65

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