无乳链球菌通过抑制酪氨酸激酶/信号转导及转录激活因子和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白的合成

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨德莲

作者： 杨德莲;童津津;孙铭维;张婕;张华;熊本海;蒋林树

作者机构：

关键词： 无乳链球菌;奶牛乳腺上皮细胞;乳蛋白合成;信号通路

期刊名称： 动物营养学报

ISSN： 1006-267X

年卷期： 2019 年 8 期

页码： 3706-3718

摘要： 本试验旨在研究无乳链球菌(GBS)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳蛋白合成的影响机理.试验用不同浓度GBS[感染复数(MOI)分别为100、50、10]感染BMECs 1、2、4、6、8、12、18、24 h,每个时间点都设立相应的空白对照,采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒、扫描电镜以及流式细胞术等方法检测GBS对BMECs活性、形态及凋亡的影响;采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot检测β-酪蛋白及乳蛋白合成相关基因的mRNA和蛋白表达量.结果表明:1) GBS对BMECs的毒性作用具有明显的时间、剂量依赖性,即随着感染时间的延长、细菌浓度的升高,LDH释放量显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01); GBS感染后细胞形态发生显著变化,感染6 h时,细胞结构断裂,感染8 h时,细胞形态结构受到严重破坏;感染2 h时,BMECs发生了显著的凋亡(P<0.05);感染6 h时,BMECs发生极显著的凋亡(P<0.01).2)感染6 h时,GBS导致BMECs中β-酪蛋白以及正调控乳蛋白表达基因酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转换及转录激活因子5a(STAT5a)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、核糖体蛋白S6(sRPS6)、催乳素受体(PRLR)、est结构域转录因子5(ELF5)mRNA表达量极显著下降(P <0. 01);负调控基因真核翻译起始因子4E结合蛋白1 (EIF4EBP1) mRNA表达量极显著上升(P<0.01); GBS导致BM ECs中β-酪蛋白、STAT5a、磷酸化-信号转导及转录激活因子5a(p-STAT5a)、mTOR、磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、AKT1蛋白表达量极显著下降(P <0.01),而磷酸化-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1 (p-AKT1)蛋白表达完全受到抑制.在感染8 h时,GBS完全抑制了β-酪蛋白、STAT5a、p-STAT5a、mTOR、p-mTOR、AKT1、p-AKT1的蛋白表达.由此可见,GBS能够损伤BM ECs的形态结构,促进细胞凋亡,降低细胞活性,从而影响细胞的正常生理功能,此外,GBS抑制BMECs乳蛋白的合成,主要通过抑制JAK/STAT、mTOR信号通路发挥作用.

分类号： S823.5

  • 相关文献

[1]青蒿素对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因表达的影响. 侯昆,李欣,沈义媛,詹经纬,牛慧,熊本海,童津津,蒋林树. 2021

[2]bta-microRNA-145对胰岛素样生长因子1受体-磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关基因表达的影响及其潜在靶标的揭示. 李文清,王加启,南雪梅,卜登攀. 2014

[3]体外法研究壳聚糖对无乳链球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤的保护作用. 孙铭维,童津津,蒋林树,熊本海,毛胜勇. 2020

[4]壳聚糖抗无乳链球菌引起的奶牛乳腺上皮细胞炎性反应. 孙铭维,童津津,蒋林树,熊本海,毛胜勇. 2020

[5]激素调控乳蛋白合成的作用及其分子机制. 文静,卜登攀,王建发,孙鹏. 2012

[6]大豆黄酮和染料木素对体外培养奶牛乳腺上皮细胞增殖及抗氧化水平的影响. 刘春龙,李忠秋,张帆,姜文博,徐岩,单安山. 2008

[7]奶牛乳腺上皮细胞三维培养的形态观察. 王秀美,考桂兰,高爱武,侯先志,高民. 2009

[8]奶牛乳腺上皮细胞不同代数对乳蛋白基因表达的影响. 韩亚南,侯先志,考桂兰,王秀美,杨金丽,高爱武,杨银芬,赵青,高民. 2012

[9]三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白基因表达的影响. 王秀美,侯先志,敖长金,高民,考桂兰,高爱武,兰儒冰,塔娜. 2013

[10]奶牛乳腺上皮细胞的二维和三维培养及培养后酪蛋白基因的表达. 王秀美,侯先志,高爱武,考桂兰,高民,李大彪,兰儒冰,张楠,张艳明,黄清瑞. 2012

[11]SIRT7对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂和乳糖合成关键基因表达的调控. 陈坤琳,钱勇,蒋临正,王慧利,邢光东,李倩倩,仲跻峰. 2019

[12]油酸对奶牛乳腺上皮细胞内甘油三酯含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响. 邢媛媛,李红磊,李大彪,胡红莲,张兴夫,高民. 2017

[13]TNF-α对体外培养奶牛乳腺上皮细胞α-SMA mRNA及蛋白表达的影响. 杨磊,王凤龙,丁玉林,丁旭娜,刘德明,赵占宽. 2013

[14]黄花蒿醇提物对奶牛乳腺细胞中共轭亚油酸合成相关酶基因表达的作用. 王丽芳,张兴夫. 2019

[15]苜蓿黄酮对脂多糖诱导下奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响. 占今舜,陈小连,詹康,苏效双,赵国琦. 2018

[16]甲状腺素及胰高血糖素对高温条件下体外培养奶牛乳腺上皮细胞热休克蛋白表达的影响. 崔瑞莲,王加启,卜登攀,魏宏阳,胡菡,周凌云. 2010

[17]bta-miR-29d-3p对奶牛乳腺上皮细胞乳脂代谢相关基因表达及甘油三酯含量的影响. 赵淑颖,姚大为,赵欣,杨春蕾,曹彦怡,张漫,丁向彬,马毅. 2023

[18]乙酸钠和β-羟丁酸钠对奶牛乳腺上皮细胞乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响. 塔娜,李红磊,侯先志,考桂兰,高民,李大彪. 2014

[19]奶牛乳腺上皮细胞体外培养条件优化的初步研究. 李喜艳,王加启,魏宏阳,卜登攀,胡菡,周凌云. 2010

[20]共轭亚油酸对奶牛乳腺上皮细胞脂肪酸摄取与转运相关基因mRNA转录的影响. 刘晶,王晓宇,侯俊财,姜成刚,王玉堂,佟慧丽,高玉红. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序