基于丝状支原体丝状亚种P35反应原性的验证及其间接ELISA方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 闫磊

作者: 闫磊;潘巧;赵雅芝;郝文君;李媛;辛九庆

作者机构:

关键词: 牛传染性胸膜肺炎;丝状支原体丝状亚种;间接ELISA

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2019 年 7 期

页码: 716-720

摘要: 为建立检测丝状支原体丝状亚种(Mmm)的间接ELISA方法,本研究利用生物信息学软件对Mmm的全基因组序列进行了分析,选定大小为540 bp的0584基因,该基因是编码分子量为35 ku的脂蛋白,并对其免疫反应原性进行研究.利用原核表达系统获得了0584基因的重组蛋白rP35,以牛传染性胸膜肺炎(CBPP)阳性血清为一抗进行western blot分析,试验结果为阴性,但Dot-blot试验结果为阳性,证明该蛋白可能是Mmm特有的一种构象依赖性免疫相关蛋白且具有反应原性.以r P35蛋白为包被抗原,通过反应条件优化初步建立了检测CBPP血清抗体的间接ELISA方法,特异性为88.0%,敏感性为89.8%,批内和批间变异系数均小于10%,与商品化试剂盒符合率为84.8%.本研究为研制CBPP血清检测试剂盒提供了一种候选蛋白.

分类号: S858.23

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