长白猪γ-干扰素基因的原核表达与分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵英杰

作者： 赵英杰;徐宏军;李尚波;王文成;卫广森;宣华

作者机构：

关键词： 长白猪;IFN-γ;原核表达;亚细胞定位;Western-blotting分析

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2006 年 36 卷 01 期

页码： 46-51

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以含长白猪IFN-γ基因的质粒载体为模板,用原核表达引物扩增了长白猪IFN-γ基因,将其定向克隆至原核表达载体pET28b的EcoRⅠ和XhoⅠ位点,构建了长白猪IFN-γ基因的原核表达载体pET28b-PoIFN-γ。经酶切、PCR鉴定,表明所构建的重组质粒为特异性长白猪IFN-γ基因原核表达质粒。将该重组质粒转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)细胞,阳性菌落筛选、SDS-PAGE分析以及Western-blotting分析表明,成功构建了表达重组猪IFN-γ的大肠埃希氏菌基因工程菌株。亚细胞定位分析表明,目的蛋白经原核表达后主要以不溶性包涵体形式存在,其他少量可溶性目的蛋白存在于细胞浆中。

分类号： S852.4

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