猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和Vβ6真核表达载体的构建及共转染研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王春燕

作者： 王春燕;陈国华;何小兵;曾爽;贾怀杰;房永祥;冯园;李守杰;景志忠

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒C株;TCR Vα/Vβ基因;脂质体转染;增强绿色荧光蛋白

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2016 年 37 卷 10 期

页码： 34-40

收录情况： 北大核心

摘要： 本实验室前期研究发现猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和TCR Vβ6基因家族,为进一步研究其体外表达情况,应用RT-PCR从猪外周血单个核细胞中扩增其全长基因序列,并构建TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒,将其转染293T细胞。结果显示,TCR Vα5和TCR Vβ6全长基因分别为816bp和945bp,双酶切和核酸序列测定证实TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒构建正确;转染293T细胞24h后荧光显微镜下可以看到70%以上的细胞表达EGFP蛋白。此外,实时荧光定量PCR可检测到TCR Vα5和TCR Vβ6基因的表达,单独转染组和共同转染组Western blot均可检测到EGFP蛋白的表达,且蛋白杂交带强度相似。研究结果表明,CSFV-C株特异性的TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP真核表达质粒可同时转染到293T细胞中,实现体外共表达。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]内蒙古绒山羊Wnt10b干扰载体的构建及鉴定. 吴子贤,吴静,王荣,周健,王瑞雪,刘俊阳,刘佳森,赵艳红. 2021

[2]梅花鹿耳成纤维细胞体外培养及转染条件优化. 高鹤轩,荣敏,刘汇涛,唐丽昕,周宏达,邢秀梅. 2024

[3]pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞条件的优化. 杨娜娜,史卫峰,崔英杰,赵晓民,杜立新. 2007

[4]EIAV[hlx1]基因转移载体转录后调控元件的优化. 韩凌霞,李亚明,曲连东,司昌德,姜骞,刘家森. 2006

[5]表达增强绿色荧光蛋白重组水疱性口炎病毒印第安纳株的构建. 温志远,葛金英,胡森,王永,步志高. 2007

[6]EIAV基因转移载体转录后调控元件的优化. 李亚明,韩凌霞,曲连东,司昌德,秦海斌,杨增岐,于海波,徐佳. 2008

[7]鸡β-肌动蛋白第一内含子对EIAV载体质粒外源蛋白表达能力的影响. 韩凌霞,李亚明,尹岚岚,司昌德,于海波,曲连东. 2007

作者其他论文 更多>>

微信小程序