烟草花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴彦辉

作者： 吴彦辉;蒲团卫;张生杰;牛龙龙;白静科;李成军;李建华

作者机构：

关键词： 烟草花叶病毒;实时荧光定量PCR;TaqMan探针法

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2023 年 51 卷 012 期

页码： 171-175

摘要： [目的]防止隐症携带烟草花叶病毒(TMV)的烟苗移栽到大田造成产量损失.[方法]根据TMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因保守序列设计引物及探针,通过绘制标准曲线、重复性、特异性及灵敏性分析,建立了一种TMV的TaqMan-qPCR检测方法.[结果]该方法特异性好,与其他常见的烟草病毒无交叉反应;灵敏度高,检测下限可达到4.53×101 copies/μL,比常规RT-PCR检测灵敏度提高了10倍;建立的标准曲线斜率为-3.299,决定系数(R2)为0.993 3,扩增效率为100.97%,且循环阈值(Ct)与质粒标准品浓度之间线性关系良好,重复性试验结果可靠.[结论]利用建立的TaqMan-qPCR检测方法与常规RT-PCR检测方法同时检测烟苗样品,检测结果一致,进一步验证了荧光定量PCR方法的可靠性.

分类号： S435.72

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