牛病毒性腹泻病毒Real-timePCR方法的建立及其应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张淑琴

作者： 张淑琴;谭斌;李鹏;杨勇;孙娜;王凤雪;郭利;温永俊;程世鹏

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;病毒检测;荧光定量聚合酶链反应

期刊名称： 特产研究

ISSN： 1001-4721

年卷期： 2014 年 36 卷 03 期

页码： 1-4

摘要： 本研究在牛病毒性腹泻病毒5'UTR基因的保守区设计并合成了1对引物,建立了可以定量检测牛病毒性腹泻病毒核酸的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法建立的标准曲线相关系数R2为0.999,扩增效率为95.9%,熔解曲线为单一峰值,可检测到初始模板中4.1×101copies/μL的牛病毒性腹泻病毒核酸,是常规RT-PCR方法敏感性的100倍。该检测方法与猪瘟病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型病毒等其它牛源病毒均不发生交叉反应;批内与批间重复性试验变异系数均小于2.2%。本试验建立的荧光定量PCR检测方法可用于牛病毒性腹泻病毒的临床诊断。同时,应用本方法对临床病例的各组织器官进行了病毒RNA定量检测结果表明,胸腺等淋巴组织的病毒含量最高,证实病毒主要侵害淋巴器官,此研究可为临床病例的病毒分离提供借鉴。

分类号： S852.659.6

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