苹果Mal d 1基因的原核表达及纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宗泽冉

作者： 宗泽冉;张彩霞;田义;张利义;韩晓蕾;丛佩华

作者机构：

关键词： 苹果;斑点落叶病;原核表达;纯化

期刊名称： 中国南方果树

ISSN： 1007-1431

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 78-82

收录情况： 北大核心

摘要： 以"王林"苹果为试材,采用RT-PCR的方法克隆获得Mal d 1基因,并将该基因连接到原核表达载体pColdⅡ上,经测序确定所构建的重组载体pCold-Mal d 1开放阅读框正确。将获得的重组质粒pCold-Mal d 1转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG 0.1mmol·L~(-1),15℃,24h冷诱导表达,SDS-PAGE电泳检测,证明Mal d 1蛋白获得了稳定而高效的表达,所表达蛋白是大小约为22.4kD的融合蛋白。经镍柱纯化后获得相对单一的蛋白,可用于免疫组织化学,蛋白印记检测等。

分类号： S436.611

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