猪源TTVTaqman实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 侯军委

作者: 侯军委;周艳君;王礞礞;李国新;于海;童光志

作者机构:

关键词: TTV1;TTV2;Taqman实时荧光定量PCR

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN:

年卷期: 2011 年 02 期

页码: 13-19

收录情况: CSCD

摘要: 根据TTV1和TTV2的非编码区(UTR)的保守序列分别设计并合成两套特异性引物和Taqman探针,建立了鉴别TTV1和TTV2的Taqman实时荧光定量PCR方法。通过常规PCR方法分别克隆TTV1和TTV2的非编码区(UTR)的保守序列并将其连入pMD18-T载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品分别绘制标准曲线,TTV1标准曲线的相关系数为0.984,TTV2标准曲线的相关系数为0.994。检测结果显示,两种方法的灵敏度均可达10copies/μL,除猪源TTV外,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪2型圆环病毒、猪流感病毒检测结果均为阴性。该方法重复性好,批内...

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