小鼠精子形成各阶段转基因效率的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张鑫

作者： 张鑫;苗向阳;尹逊河;马艳芳;曲朝杰;张秋婷

作者机构：

关键词： 精子形成;睾丸注射;转基因鼠

期刊名称： 生物化学与生物物理进展

ISSN： 1000-3282

年卷期： 2009 年 36 卷 08 期

页码： 1019-1024

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 在过去的近30年中,转基因技术在哺乳动物基因表达方面研究的应用已经成为实验生物学及应用生物学领域最为显著的进展之一.传统的制作转基因动物方法有显微注射法、逆转录病毒感染法和胚胎干细胞法等,但每种方法都有其缺陷,限制了其在今后转基因动物研究中的广泛应用.对小鼠体内生殖细胞进行外源基因转染,研究精子形成过程中制作转基因小鼠的效率.首先运用睾丸注射法将被脂质体包裹的绿色荧光蛋白表达载体(pIRES2-EGFP)注射到公鼠睾丸及附睾内,然后根据精子形成的不同阶段,分别于注射后7、16、30和42天与发情母鼠合笼,利用PCR和DNA印迹方法对新生小鼠进行基因组DNA检测.在各阶段所得新生小鼠中PCR阳性率分别为6.82%、0、56.86%和42.86%,DNA印迹检测阳性率分别为6.82%、0、47.06%、34.69%.经活体荧光成像系统及荧光显微镜分析,转基因小鼠呈现绿色荧光表达.通过比较精子生成各阶段转基因效率高低,为以后通过用睾丸内注射法转染雄性生殖细胞高效制作转基因动物提供了理论依据.

分类号： Q78

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