滑液囊支原体NADH氧化酶单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘晓涵

作者： 刘晓涵;祁晶晶;胡增金;李浩然;宋翠萍;尚原冰;王少辉;田明星;李涛;丁铲;蔡玉梅;于圣青

作者机构：

关键词： 滑液支原体;NADH氧化酶;单克隆抗体

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 006 期

页码： 20-27

收录情况： 北大核心

摘要： 为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体.将本实验室前期构建好的重组菌株E.coli BL21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F4.单克隆抗体亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG2b亚类,间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2 048 000.经Western blot和悬浮免疫荧光试验鉴定,该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应,与其他禽致病菌不发生反应.通过染色体分析,该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体,符合杂交瘤细胞染色体的数目,证实细胞融合成功.本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体,为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料.

分类号： S852.4

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