牛传染性鼻气管炎病毒gE基因的截短克隆与表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王海燕

作者： 王海燕;朱远茂;薛飞;童光志;赵立平;相文华;韩文瑜

作者机构：

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒;gE基因;克隆;表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2006 年 28 卷 03 期

页码： 289-293

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以牛传染性鼻气管炎病毒BarthaNu/67株的DNA作为模板,用PCR扩增gE基因并克隆至pGEM-TEasy载体,再以此质粒作为模板将gE基因分成6个片段,分别插入原核表达载体pET32a并在大肠杆菌中进行了表达。蛋白电泳结果表明6个片段中有2个片段以可溶形式表达,1个片段以包涵体形式表达,另外3个片段没有表达。采用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下对两个可溶性片段进行了纯化。经免疫印迹试验,间接ELISA和交叉试验证明,两个纯化的重组蛋白均与牛传染性鼻气管炎阳性血清样品发生反应,而与牛传染性鼻气管炎阴性血清无任何反应,显示其具有良好的抗原性和特异性,可用于牛传染性鼻气管炎gE-ELISA诊断方法的建立。

分类号： S852.65

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