山羊myostatin基因慢病毒RNA干扰载体的构建及效果验证

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陆健

作者: 陆健;张世芳;张小宁;刘佳森;李碧春;赵福平;张莉;魏彩虹;杜立新

作者机构:

关键词: myostatin基因;山羊胎儿成纤维细胞;慢病毒载体;RNA干扰

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2012 年 39 卷 09 期

页码: 1-6

收录情况: 北大核心

摘要: myostatin基因是肌肉生长和发育的关键负调控因子之一,该基因突变或失活的物种都呈现肌肉增大的双肌表型,暗示在家畜中使该基因失活可以增加其产肉量。为了进一步揭示myostatin在山羊胎儿成纤维细胞中的生物学功能以及制备可有效失活myostatin基因的工具,将筛选的myostatin基因潜在RNA干扰靶位点连接到慢病毒干扰载体的转移质粒中,构建慢病毒介导的RNA干扰载体,验证其干扰效果。结果表明,干扰序列与转移质粒连接正确,成功构建myostatin基因慢病毒干扰载体,慢病毒三质粒共转293T细胞,获得的慢病毒颗粒可高效转染山羊胎儿成纤维细胞,Real-time PCR检测发现慢病毒干扰载体Lv322有效减少山羊胎儿成纤维细胞中myostatin基因mRNA 75%的表达(P<0.01),Western blotting检测显示myostatin蛋白则有效降低了94%(P<0.01)。本试验为研究myostatin基因的功能及制备失活转基因动物提供有效工具以及理论基础。

分类号: S827`S852.4

  • 相关文献

[1]动物转基因新技术研究进展. 陈青,曹文广. 2011

[2]p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析. 刘超,邱亚峰,沈阳,刘庆伟,马志永. 2010

[3]绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达. 楚秋霞,王二耀,吴姣,陈付英,王治方,辛晓玲,施巧婷,冯亚杰,李文军,魏成斌,徐照学. 2013

[4]脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化. 丰秀静,曹少先,孟春花,王慧利,钱勇,王锋,成勇. 2011

[5]稳定表达外源TLR9基因的山羊胎儿成纤维细胞系的建立. 刘太安,房永祥,贾怀杰,马保华,何小兵. 2013

[6]Myostatin基因打靶载体的构建及猪胎儿成纤维细胞Myostatin基因的敲除. 李鸿辉,冯冲,王宁,闫军,哈福,陈红星,樊宝良,潘登科. 2010

[7]体细胞克隆制备肌肉生长抑制素(Myostatin)基因敲除猪. 李鸿辉,冯冲,王宁,闫军,龙川,郑道山,李西睿,罗学明,朱彦宾,潘登科. 2010

[8]东北马鹿Myostatin基因单核苷酸多态性研究. 巴恒星,邢秀梅,刘晓颖,张秀华,苗利光,杨福合. 2009

[9]绵羊Myostatin基因敲除载体的构建. 孙丹,金梅,杜立新,魏彩虹,张莉,路国彬,陆健,吕延飞. 2011

[10]表达人尿激酶原突变体的重组山羊乳腺特异性表达慢病毒载体的构建. 于永生,罗晓彤,吴晓洁,周艳荣,陈红星,邓继先. 2009

[11]稳定敲低人脐带间充质干细胞EPCR基因对其向成纤维细胞分化能力的影响. 苟好,彭单伊,刘姜,吴羡,邹琳,符州. 2020

[12]背部肌肉注射含IGF2b基因慢病毒载体对鲤鱼生长的影响. 雷莹,苏胜彦,丁敬波,刘浩亮,袁新华. 2014

[13]牦牛"海绵吸附"bta-miR-125b的lncRNA筛选验证及慢病毒载体构建. 贺鸿世,姚一龙,索朗斯珠,孟朝轶,孔庆辉,席广银,郭敏,徐业芬. 2024

[14]梅花鹿ColX基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定. 褚文辉,赵海平,杨福合,邢秀梅,李春义. 2010

[15]山羊乳腺特异性表达慢病毒载体的构建与验证. 朴庆林,于永生,罗晓彤,金海国. 2009

[16]慢病毒载体介导的IGF2b基因在鲤鱼背部肌肉组织中过表达对鲤鱼生长的影响. 张宁,苏胜彦,袁新华,马庆男,董在杰. 2015

[17]慢病毒介导多短发卡RNA串联载体构建与体内外抗口蹄疫效果评估. 张晓溪,李兰玉,刘庆友,郑海学,李湘萍,崔奎青,石德顺. 2014

[18]梅花鹿ColⅩ基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定. 褚文辉,赵海平,杨福合,邢秀梅,刘国庆,李春义. 2009

[19]猪催乳素的真核表达与生物活性验证. 谢社风,韩贝贝,高凤磊,马莹,李莉,张守全,邹娴,卫恒习. 2024

[20]慢病毒载体的构建及其应用于转基因动物的研究进展. 孙克宁,朱化彬,林峰,王栋,郝海生,杜卫华,赵学明. 2010

作者其他论文 更多>>