鲤鱼cDNA-AFLP技术反应体系的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李飞

作者: 李飞;贾智英;闵霞;石连玉

作者机构:

关键词: cDNA-AFLP;鲤鱼;反应体系;水产动物

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2011 年 30 卷 01 期

页码: 122-128

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将cDNA扩增片段长度多态性(cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术应用在鲤鱼基因的转录表达研究中,本文通过对cDNA-AFLP主要步骤的优化和改进,建立起鲤鱼cDNA-AFLP反应体系。结果表明,采用MseⅠ和BstYⅠ酶切鲤鱼cDNA100ng,分别处理2h和3h后,以接头浓度分别为2pmol/μL和0.2pmol/μL、T4连接酶浓度为0.12U/μL的反应体系进行连接。以稀释50倍的预扩增产物为模板、BstYⅠ和MseⅠ比例为1:4的引物配比进行选择扩增可得到稳定的扩增结果。本研究建立的cDNA-AFLP技术将为鲤鱼转录组研究建立基础和技术支持。

分类号: S917.4`Q78

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