马γ-干扰素单克隆抗体的制备及其特性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 白宇

作者: 白宇;童铁钢;刘光亮;肖一红;王群;徐树兰;张维军;吴东来

作者机构:

关键词: 马γ-干扰素;单克隆抗体

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1006-1304

年卷期: 2008 年 16 卷 01 期

页码: 10-14

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将原核表达的重组马γ-干扰素成熟蛋白(mEIFN-γ)免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,以昆虫杆状病毒表达系统获得的重组马γ-干扰素作为检测抗原进行间接ELISA检测,共筛选并最终得到了12株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株。利用间接免疫荧光(IFA)试验对12株单克隆抗体进行鉴定,结果证实所获得的12株细胞分泌的抗体均为针对马γ-干扰素的特异性抗体。单克隆抗体亚型鉴定结果显示,4株为IgG1、2株为IgG2a、3株为IgG2b和3株为IgM,而且所有单克隆抗体的轻链均为"链。将此12株单克隆抗体分别与用原核系统分节段表达的重组马γ-干扰素GST-mEIFN-γ(1 ̄84)和GST-mEIFN-γ(80 ̄146)蛋白进行特异性ELISA检测,结果表明有7株单克隆抗体识别GST-mEIFN-γ(1 ̄84),而另5株单克隆抗体与GST-mEIFN-γ(80 ̄146)发生反应,说明所获得的12株单克隆抗体至少针对2个或2个以上不同的抗原表位。

分类号: S852.43

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